Mieloperoxidasa (MPO) es una enzima que contiene hemo, encontrada principalmente en los leucocitos polimorfonucleares (neutrófilos) y monocitos. Desempeña un papel crucial en la inmunidad innata al catalizar la formación de oxidantes reactivos, principalmente ácido hipocloroso (HOCl), a partir de peróxido de hidrógeno y iones cloruro. Esta actividad enzimática es fundamental para la función microbicida de las células inmunitarias e influye en varias vías metabólicas e inflamatorias.
Rol de la MPO en el metabolismo
- MPO cataliza la conversión de peróxido de hidrógeno (H₂O₂) y iones cloruro (Cl⁻) en ácido hipocloroso (HOCl): un potente agente oxidante que contribuye a la eliminación de patógenos.
- Más allá de la defensa del huésped: La oxidación mediada por MPO modifica biomoléculas como las lipoproteínas de baja densidad (LDL), formando LDL oxidadas por MPO (Mox-LDL), que están involucradas en la inflamación vascular y la aterosclerosis.
- La actividad de la MPO influye en el estrés oxidativo y la señalización inflamatoria: asociándola con enfermedades metabólicas y daño vascular.
Principio de los Kits de Ensayo de Actividad de MPO
Los kits de ensayo de MPO proporcionan una medición cuantitativa de la actividad enzimática de MPO en muestras biológicas como lisados celulares, extractos de tejidos, suero, plasma y fluidos corporales. Se utilizan dos métodos comunes de detección:
- Ensayos colorimétricos: Dependen de la MPO para catalizar la oxidación de sustratos (por ejemplo, o-dianisidina o sondas cromogénicas) en presencia de H₂O₂, produciendo un producto coloreado que puede medirse por absorción. La intensidad del color está correlacionada con la actividad de la MPO.
- Ensayos fluorométricos: Detectan la actividad de MPO a través de sustratos fluorescentes que emiten luz cuando son oxidados por la MPO, ofreciendo mayor sensibilidad y adecuación para pruebas de alto rendimiento.
Características Principales de los Kits de Ensayo de MPO
- Alta sensibilidad: límites de detección tan bajos como 0,05 mU por pozo.
- Versatilidad: aplicable a varios tipos de muestras, incluyendo suero humano, plasma, homogeneizados de tejidos y lisados celulares.
- Cuantitativo: permite determinar las unidades de actividad de la MPO, facilitando la comparación entre muestras.
- Uso extenso: en investigaciones sobre inflamación, estrés oxidativo, enfermedades cardiovasculares y respuesta inmune.
Relevancia Biológica y Clínica
El HOCl generado por MPO y las especies reactivas asociadas contribuyen a la eliminación de patógenos, pero también causan modificaciones oxidativas en los tejidos del huésped. La actividad de MPO está asociada a:
- Enfermedades inflamatorias: como la aterosclerosis, donde el LDL modificado por MPO promueve disfunción endotelial y formación de placas.
- Daño tisular relacionado con el estrés oxidativo.
- Posible biomarcador: para riesgo cardiovascular y objetivo terapéutico.
Los kits de ensayo de MPO permiten la cuantificación precisa de la actividad de MPO, una enzima clave que conecta el metabolismo inmune y el estrés oxidativo. Su aplicación avanza en la comprensión del papel de MPO en la salud y la enfermedad, particularmente en la inflamación y la patología vascular.