Anticorpos primários anti-hamster conjugados com PE são reagentes imunoquímicos para a detecção de antígenos-alvo em amostras derivadas de hamster utilizando metodologias baseadas em fluorescência. São produzidos pela imunização de espécies hospedeiras, como cabra ou coelho, com imunoglobulinas de hamster purificadas; esses anticorpos são purificados por cromatografia de imunoafinidade e conjugados à ficoeritrina (PE), uma ficobiliproteína altamente fluorescente caracterizada por um elevado rendimento quântico e coeficiente de extinção molar. Após a excitação, o conjugado emite intensa fluorescência de cor laranja-vermelha, permitindo a detecção de antígenos com alta sensibilidade sem necessidade de amplificação enzimática do sinal. Dependendo do reagente, a especificidade do anticorpo pode ser dirigida contra as cadeias pesadas e leves (H+L) das imunoglobulinas de hamster ou restrita a isotipos específicos. Muitas preparações são pré-adsorvidas contra proteínas séricas de outras espécies para minimizar a reatividade cruzada e melhorar a especificidade da coloração.
Aplicações
Os anticorpos primários anti-hamster conjugados com PE são amplamente utilizados em imunoensaios baseados em fluorescência que requerem detecção de antígenos sensível e quantitativa. Em citometria de fluxo, permitem a análise tanto de antígenos de superfície celular como intracelulares em populações celulares heterogéneas. Em microscopia de imunofluorescência, facilitam a visualização e localização de proteínas-alvo em células cultivadas e secções de tecido. Aplicações adicionais incluem a separação celular ativada por fluorescência (FACS), imunoensaios multiplex baseados em esferas e ELISpot. As concentrações ótimas de anticorpo devem ser determinadas empiricamente para cada protocolo experimental, a fim de obter a melhor relação sinal-fundo. Estes reagentes destinam-se exclusivamente a uso em investigação e não estão aprovados para aplicações diagnósticas ou terapêuticas.
