Webinar : Enzymatic Workflows for Protein Characterization

Este webinar apresenta um fluxo de trabalho enzimático integrado para a caracterização estrutural completa de proteínas terapêuticas, incluindo anticorpos monoclonais, biossimilares e proteínas recombinantes. A apresentação demonstra como a PNGase F, a Tripsina MS Grade e a Carboxipeptidase B atuam de forma sinérgica para permitir uma análise completa da proteína através do perfilamento de N-glicanos, mapeamento de peptídeos com identificação de modificações pós-traducionais (PTM) e caracterização do terminal C.

No desenvolvimento e controlo de qualidade de bioterapêuticos, a caracterização detalhada dos atributos críticos de qualidade (CQAs) é essencial para garantir a segurança, eficácia e consistência entre lotes. A N-glicosilação influencia profundamente a farmacocinética, as funções efetoras e a potencial imunogenicidade, exigindo um perfilamento preciso da heterogeneidade de glicanos através da libertação enzimática com PNGase F e análise subsequente. O mapeamento de peptídeos, facilitado pela digestão com tripsina de alta qualidade, continua a ser uma técnica fundamental para confirmar a integridade da sequência primária de aminoácidos, detetar PTMs específicas do local (como oxidação, desamidação e glicosilação) e identificar variantes de sequência ou truncamentos – requisitos essenciais em submissões regulatórias tanto para novos terapêuticos como para biossimilares. Complementando estes passos, o tratamento com Carboxipeptidase B permite uma avaliação precisa da heterogeneidade do terminal C, incluindo o corte de lisina, que afeta os perfis de carga e as impurezas relacionadas com o produto, frequentemente monitorizadas por cromatografia de troca iónica ou espectrometria de massa.

Esta abordagem multi-enzimática supera as limitações das análises de método único ao fornecer dados ortogonais e sinérgicos que suportam exercícios robustos de comparabilidade, otimização de processos e conformidade com requisitos regulatórios rigorosos (por exemplo, diretrizes ICH Q6B e avaliações de similaridade de biossimilares). Os participantes obterão conhecimento sobre o fundamento científico deste fluxo de trabalho, aprenderão a interpretar os resultados analíticos de cada etapa enzimática e compreenderão a sua aplicação prática na resolução de CQAs críticos para submissões regulatórias bem-sucedidas e desenvolvimento biofarmacêutico.

Orador

Dr. Pavan Kumar Avula, PhD
Senior Manager – Techno Commercial, Provis Biolabs

O Dr. Avula é doutorado em Neurociências pela University of Melbourne e possui um mestrado em Biotecnologia pela La Trobe University. Como Senior Manager na Provis Biolabs, especializa-se no apoio a fluxos de trabalho analíticos para a caracterização de proteínas terapêuticas, colaborando de perto com investigadores biofarmacêuticos e laboratórios de controlo de qualidade. O seu papel combina um profundo entendimento científico com competência prática na implementação.