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Western blotting é uma técnica laboratorial amplamente utilizada para detetar e quantificar proteínas específicas em amostras biológicas complexas. O método geralmente envolve a separação de proteínas por SDS-PAGE, a transferência para uma membrana e a detecção baseada em anticorpos das proteínas alvo. A deteção frequentemente depende de reações enzimáticas que produzem um sinal mensurável, como quimioluminescência.
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No Western blotting, os anticorpos primários detetam as proteínas alvo na membrana, utilizando proteínas housekeeping como GAPDH e β-Actina como controlos de carga. Um anticorpo secundário conjugado com HRP reage com um substrato HRP para produzir um sinal luminiscente, enquanto as escadas de proteínas fornecem marcadores de peso molecular para uma estimativa precisa do tamanho.
Extratos de células inteiras blotados com anticorpo anti-GAPDH [GT239] (GTX627408).
- Anticorpo monoclonal específico para GAPDH.
- Validado para aplicações de Western blot.
- Deteta com sucesso GAPDH em diversos extratos de células inteiras.
- Compatível com SDS-PAGE e deteção utilizando um anticorpo secundário.
Anticorpo Anti-beta Actina [HL1926]
Diversos extratos de células inteiras blotados com anticorpo anti-beta actina [HL1926] (GTX637675).
- Anticorpo monoclonal de coelho direcionado para β-actina.
- Comumente utilizado como controlo de carga em Western blotting.
- Fornece deteção fiável em ensaios de Western blot.
- Compatível com anticorpos secundários conjugados com HRP para deteção de sinal.
Substratos HRP Trident femto Western
A proteína recombinante mCherry foi detetada utilizando um anticorpo anti-mCherry, seguido de um anticorpo secundário conjugado com HRP e substrato HRP Trident femto (GTX14698).
- Sistema de substrato quimioluminescente para deteção de HRP.
- Desenvolvido para alta sensibilidade, detetando atividade HRP até ao nível de femtogramas.
- Composto por duas soluções misturadas antes da utilização.
- Adequado para detetar proteínas de muito baixa abundância.
Escada de proteínas Trident Prestained
Padrão de migração da GTX49384 Escada de proteínas Trident Prestained (intervalo padrão) em gel Tris-Glicina.
- Escada de proteínas pré-colorida com cromóforos coloridos ligados covalentemente.
- Cobre um amplo intervalo de pesos moleculares (~10–180 kDa em buffers padrão).
- Permite monitorização em tempo real da electroforese.
- Permite a avaliação da transferência de proteínas para membranas.
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