Producción y purificación de proteínas en un sistema procariótico.

Podemos producir diferentes cantidades de proteínas recombinantes según su proyecto. Esta producción se realiza en dos pasos:
1- prueba de expresión recombinante: para verificar la viabilidad de la solicitud
2- producción a gran escala y purificación de la proteína recombinante

El paso 2 se inicia cuando los datos del paso 1 han sido analizados y el cliente ha validado los resultados.

Paso 1 - Protocolo estándar para probar la expresión recombinante:
- Transformación de bacterias de alto rendimiento
- Cultivo de bacterias (bajo condiciones de cultivo dependiendo de las cantidades requeridas)
- Inducción de la síntesis recombinante (cinética de 5 horas)
- Purificación de afinidad en resina específica
- Análisis de lisados en gel
Opciones: Análisis 1- de la solubilidad recombinante 2- del rendimiento de producción

Paso 2 - Protocolo estándar de producción a gran escala y purificación de la recombinante:
- Cultivo de bacterias
- Inducción de la síntesis recombinante (bajo condiciones de cultivo predefinidas en el paso 1)
- Preparación de lisados bacterianos
- Purificación de afinidad en resina específica
- Opción: Eliminación de la etiqueta (ej.: escisión enzimática del GST-Tag)

Nota: La cantidad final de proteína recombinante no puede garantizarse.

Números clave:
- Volumen de cultivo: Paso 1: 300 ml / Paso 2: 1 litro
- Cinética de expresión recombinante: 5 horas
- Duración del protocolo: Paso 1: 10 días / Paso 2: 5 días

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