Webinar : Enzymatic Workflows for Protein Characterization

Este webinar presenta un flujo de trabajo enzimático integrado para la caracterización estructural completa de proteínas terapéuticas, incluyendo anticuerpos monoclonales, biosimilares y proteínas recombinantes. La presentación demuestra cómo PNGase F, Trypsin MS Grade y Carboxypeptidase B funcionan de manera sinérgica para permitir un análisis completo de proteínas mediante perfilado de N-glicanos, mapeo de péptidos con identificación de modificaciones post-traduccionales (PTM) y caracterización del extremo C-terminal.

En el desarrollo y control de calidad de bioterapéuticos, la caracterización detallada de los atributos críticos de calidad (CQAs) es esencial para garantizar la seguridad, eficacia y consistencia entre lotes. La N-glicosilación influye profundamente en la farmacocinética, las funciones efectoras y la posible inmunogenicidad, lo que requiere un perfilado preciso de la heterogeneidad de glicanos mediante la liberación enzimática con PNGase F y su posterior análisis. El mapeo de péptidos, facilitado por la digestión con tripsina de alta calidad, sigue siendo una técnica fundamental para confirmar la integridad de la secuencia de aminoácidos primaria, detectar PTMs específicas del sitio (como oxidación, desamidación y glicosilación) e identificar variantes de secuencia o truncamientos —requisitos clave en las presentaciones regulatorias tanto para nuevos terapéuticos como para biosimilares. Complementando estos pasos, el tratamiento con Carboxypeptidase B permite evaluar con precisión la heterogeneidad del extremo C-terminal, incluyendo el recorte de lisina, que afecta los perfiles de carga y las impurezas relacionadas con el producto, a menudo monitoreadas mediante cromatografía de intercambio iónico o espectrometría de masas.

Este enfoque multi-enzimático supera las limitaciones de los análisis de un solo método al proporcionar datos ortogonales y sinérgicos que respaldan ejercicios robustos de comparabilidad, optimización de procesos y cumplimiento de estrictas expectativas regulatorias (p. ej., directrices ICH Q6B y evaluaciones de similitud de biosimilares). Los asistentes obtendrán información sobre el fundamento científico de este flujo de trabajo, aprenderán a interpretar los resultados analíticos de cada paso enzimático y comprenderán su aplicación práctica para resolver CQAs críticos en presentaciones regulatorias exitosas y en el desarrollo biofarmacéutico.

Ponente

Dr. Pavan Kumar Avula, PhD
Senior Manager – Techno Commercial, Provis Biolabs

El Dr. Avula posee un doctorado en Neurociencias de la University of Melbourne y una maestría en Biotecnología de La Trobe University. Como Senior Manager en Provis Biolabs, se especializa en apoyar flujos de trabajo analíticos para la caracterización de proteínas terapéuticas, colaborando estrechamente con investigadores biofarmacéuticos y laboratorios de control de calidad. Su rol combina un profundo entendimiento científico con experiencia en la implementación práctica.