Un fluorómetro es un instrumento sofisticado diseñado para medir la fluorescencia emitida por una muestra después de ser excitada por una longitud de onda específica de luz. Este dispositivo es crucial en varios campos científicos, incluyendo bioquímica, monitoreo ambiental y diagnóstico médico, donde ayuda a cuantificar la presencia y concentración de moléculas fluorescentes, conocidas como fluoróforos.

Principio de operación

La fluorescencia ocurre cuando una sustancia absorbe luz a una longitud de onda y la reemite a una longitud de onda más larga. Un fluorómetro generalmente consta de varios componentes clave:

• Fuente de luz: Generalmente una lámpara de xenón o láser que proporciona la luz de excitación.
• Monocromadores o filtros: Estos seleccionan las longitudes de onda específicas de luz utilizadas para la excitación y emisión. Los fluorómetros con filtros utilizan filtros ópticos, mientras que los espectrofluorómetros emplean monocromadores para una mayor flexibilidad en la selección de longitudes de onda.
• Soporte para muestra (Cuveta): Es donde se coloca la muestra para el análisis. Debe estar hecho de materiales que no fluorescan a las longitudes de onda que se están utilizando.
• Detector: Comúnmente un tubo fotomultiplicador (PMT) o un dispositivo de carga acoplada (CCD), que mide la intensidad de la fluorescencia emitida.

Tipos de fluorómetros

Existen dos tipos principales de fluorómetros:

• Fluorómetros de filtro: Estos suelen ser menos costosos y utilizan filtros ópticos fijos para seleccionar las longitudes de onda de excitación y emisión. Son más sencillos, pero ofrecen menor sensibilidad y resolución en comparación con los espectrofluorómetros.
• Espectrofluorómetros: Estos utilizan monocromadores para seleccionar las longitudes de onda, lo que permite una mayor flexibilidad y sensibilidad. Pueden ajustarse a un rango amplio de longitudes de onda, lo que los hace adecuados para análisis más complejos.

Aplicaciones

Los fluorómetros se utilizan ampliamente en:

• Investigación biológica: Para cuantificar ácidos nucleicos y proteínas en muestras, a menudo en concentraciones muy bajas (hasta partes por trillón).
• Monitoreo ambiental: Para detectar contaminantes o monitorear procesos biológicos en ecosistemas.
• Diagnóstico médico: En ensayos que requieren alta sensibilidad para detectar biomoléculas específicas.
• Aplicaciones industriales: Como el control de calidad en productos farmacéuticos y alimentos.