Sequenciação de nova geração (NGS)

Sequenciação de nova geração (NGS)

A sequenciação de nova geração (NGS), também conhecida como sequenciação de elevado rendimento, é o termo global utilizado para descrever uma série de tecnologias de sequenciação modernas diferentes, incluindo:
  • sequenciação Illumina® (Solexa)
  • sequenciação Roche 454
  • Ion torrent: Sequenciação Proton / PGM
  • sequenciação SOLiD
Estas tecnologias recentes permitem-nos sequenciar o ADN e o ARN de forma muito mais rápida e barata do que a sequenciação Sanger anteriormente utilizada e, como tal, revolucionaram o estudo da genómica e da biologia molecular
 
Os métodos de sequenciação de ADN de nova geração têm três etapas gerais:
 
  • Preparação da biblioteca: as bibliotecas são criadas utilizando a fragmentação aleatória do ADN, seguida de ligação com ligantes personalizados
  • Amplificação: a biblioteca é amplificada utilizando métodos de amplificação clonal e PCR
  • Sequenciação: O ADN é sequenciado utilizando uma de várias abordagens diferentes
A tecnologia de sequenciação de nova geração (NGS) Illumina® utiliza a amplificação clonal e a sequenciação por síntese (SBS) para permitir uma sequenciação rápida e precisa. O processo identifica simultaneamente as bases de ADN enquanto as incorpora numa cadeia de ácido nucleico. Cada base emite um sinal fluorescente único à medida que é adicionada à cadeia em crescimento, que é utilizado para determinar a ordem da sequência de ADN.
A tecnologia NGS pode ser utilizada para sequenciar o ADN de qualquer organismo, fornecendo informações valiosas em resposta a quase todas as questões biológicas. Sendo uma tecnologia altamente escalável, a sequenciação de ADN pode ser aplicada a regiões pequenas e específicas ou a todo o genoma através de uma variedade de métodos, permitindo aos investigadores investigar e compreender melhor a saúde e a doença.